2022-2023年度内蒙古大学应用成果信息
提高DNA甲基化的小鼠胚胎干细胞培养液及小鼠胚胎干细胞诱导培养方法
主要完成人:吴宝江;包斯琴;张宝静;李喜和
成果完成时间:2019年11月
技 术 领 域:生物医学
申请(专利)号:CN201911135063.7
成 果 类 型:专利技术
成 果 简 介:
本发明公开了一种提高DNA甲基化的小鼠胚胎干细胞培养液及小鼠胚胎干细胞诱导培养方法,第一步将小鼠2i/LESCs用N2B27中添加白血病抑制因子(LIF培养液)进行诱导获得只依赖LIF的小鼠胚胎干细胞(LESCs),并鉴定了其多能性。第二步是将小鼠2i/LIFESCs培养体系换成15%胎牛血清中添加白血病抑制因子的培养液(S/L培养液),培养5天后,再替换成LIF培养液进行培养,高效率得到LESCs。更换S/L培养液的主要目的是为了提高小鼠ESCs的DNA甲基化水平,这样可有效提高LIF依赖性ESCs的重编程效率。本发明首先诱导了只依赖LIF的小鼠ESCs,并鉴定了其特性;其次利用特定的诱导方法提高了LIF依赖性小鼠ESCs重编程效率,对哺乳动物多能干细胞体外培养提供新思路。